标准集团（香港）有限公司：按照宁夏化学分析测试协会团体标准工作程序，标准起草组已完成《枸杞叶及枸杞茶中黄酮类化合物的测定》团体标准征求意见稿的编制工作。现按照宁夏化学分析测试协会《团体标准制修订程序》要求，公开征求意见。请有关单位及专家提出宝贵意见，并将征求意见表于2023年2月28日前反馈给秘书处。

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。本文件由宁夏化学分析测试协会归口。本文件起草单位：宁夏回族自治区药品检验研究院(国家枸杞产品质量检验检测中心(宁夏))、中国科学院兰州化学物理研究所、宁夏食品药品检验研究院。

　　本文件规定了枸杞叶及枸杞茶中总黄酮含量的分光光度计测定方法和枸杞叶及枸杞茶中黄酮类化合物含量的高效液相色谱测定方法。本文件适用于枸杞叶及枸杞茶中总黄酮及黄酮类化合物含量的测定。

　　原理：

　　试样中的黄酮类化合物的分子结构上具有邻二酚羟基，可以在弱碱性条件下与铝盐络合，形成稳定的红色化合物，在可见光区域(510 nm)显色。在一定浓度范围内，该化合物的吸光度值与总黄酮含量成正比，符合郎伯-比尔定律。

　　仪器与设备：

　　1.紫外分光光度计。

　　2.分析天平，感量0.00001g。

　　3.粉碎机。

　　4.超声波清洗器。

　　5.超纯水机。

　　6.水浴锅。

　　试样制备：

　　取枸杞叶(枸杞茶)样品，粉碎，过3号筛，置干燥器中保存，待用。取枸杞叶(枸杞茶)约1g(精确至0.0001g)，置三角瓶中，加50 mL 70%的乙醇溶液(5.2.2)冷浸30 min，水浴回流提取1h，滤过，分取滤液，药渣再加30 mL 70%的乙醇溶液(5.2.2)，水浴回流提取1h，过滤，合并滤液，用乙醇溶液(5.2.2)洗涤滤渣并定容至100mI的量瓶中.摇匀，作为试液，待用。

　　标准曲线的绘制：

　　精密吸取芦丁标准储备液(5.4)0mL、0.1mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.0mL 置于 10mL 容量瓶中，分别加水使成 2.4 mL，各加 5%亚硝酸钠溶液(5.2.3)0.4 mL，摇匀，放置 6 min，加 10%硝酸铝溶液(5.2.4)0.4 mL，摇匀，放置 6 min，加 4%氢氧化钠溶液(5.2.5)1 mL，加水至刻度，摇匀，放置 15 min，以相应试剂作空白，在 510 nm 波长处测定吸光度值，以芦丁质量浓度ρ(ug/mL)为横坐标，相应的吸光度值 A 为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程。

　　测定步骤：

　　精密量取(7)待测液1.0mL，加5%亚硝酸钠溶液(5.2.3)0.4 mL，摇匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液(5.2.4)0.4 mL，摇匀，放置6 min，加4%氢氧化钠溶液(5.2.5)1 mL，加水至刻度，摇匀，放置15 min，试样于波长509 nm处测定，以测得吸光值由标准曲线查的试样待测液中总黄酮的含量，同时做空白实验。

　　精密度：

　　在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。